Пцр слюна на микоплазма пневмония

Пцр слюна на микоплазма пневмония thumbnail

Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».

Исследуемый материал
Слюна

Определение ДНК Mycoplasma pneumoniae в слюне методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Микоплазмы играют значительную роль в возникновении ряда заболеваний человека. В настоящее время известны около 40 видов семейства Mycoplasmataceae. Человек является естественным хозяином, по крайней мере, 15 видов микоплазм. Среди них ведущую роль в развитии заболеваний органов дыхания играет M. pneumoniae. Однако микоплазма пневмония способна поражать не только дыхательную систему. Описаны неврологические, дерматологические, желудочно-кишечные нарушения, напрямую или косвенно вызванные инфицированием этим микроорганизмом. M. pneumoniae является высоковирулентным возбудителем, поражающим в первую очередь дыхательную систему. Заражение происходит воздушно-капельным путем, источником является инфицированный человек. Как при естественном, так и при экспериментальном заражении после инкубационного периода продолжительностью от 3 до 11 дней заболевают 40-90% пациентов. Невосприимчивые к микоплазме пациенты выделяют возбудитель и могут служить источником инфекции в течение нескольких недель. У них закономерно формируется рост титра антител без клинических симптомов заболевания. Формирующийся к микоплазме пневмония иммунитет нестоек. Наиболее часто M. pneumoniae поражает верхние и нижние дыхательные пути. Респираторный микоплазмоз очень распространен в популяции людей и обычно составляет 10-16% всех случаев острых респираторных заболеваний (ОРЗ). В период эпидемических вспышек доля M. pneumoniae в этиологической структуре острых инфекций органов дыхания может составлять 30-40%. Отмечено, что респираторный микоплазмоз характеризуется определенными возрастными особенностями. Наибольшая заболеваемость микоплазменными инфекциями отмечается у детей школьного возраста. 

Нередко (особенно у детей школьного возраста и молодых людей) инфекционный процесс в верхних дыхательных путях распространяется на терминальные отделы респираторного тракта, приводя к развитию пневмонии. Частота легочных микоплазмозов может значительно варьировать в зависимости от эпидемиологической ситуации: во время подъемов заболеваемости частота микоплазменных пневмоний достигает 35%, а в периоды эпидемиологического благополучия составляет лишь 2-6% от общего числа пневмоний. У детей и подростков 5-17 лет микоплазменная пневмония может составлять до 45% всех пневмоний. Долгое время из-за сложности культивирования диагностика микоплазменной инфекции была возможна только в условиях специализированных лабораторий. Разработка и оптимизация новых высокочувствительных методов, таких как ПЦР и иммуноферментный анализ, способствовали прогрессу в изучении данной проблемы. 

Аналитические показатели:

  • определяемый фрагмент – специфичный участок ДНК Mycoplasma pneumoniae;
  • специфичность определения – 100%;
  • чувствительность определения – 100 копий в пробе.
  • Литература

    • Ноников В.Е., Воробьева М.Г. Микоплазменные инфекции. Consilium Medicum. 2006;8(10):38-41. 
    • Самсыгина Г.А. Микоплазмоз респираторного тракта у детей и подростков. Педиатрия. – М. 2009;3:78-81.
    • Таточенко В.К. Пневмония у детей: диагностика и лечение. Лечащий врач. – М. 2008;8:5-9.
    • Хулуп Г.Я., Василевский И.В., Качан Г.Л., Костюк С.А., Силич Т.В. Роль микоплазменной инфекции в возникновении и течении заболеваний органов дыхания у детей и подростков. Медицина. – М. 2007;4:43-47.
    • Sánchez-Vargas F.M., Gómez-Duarte O.G. Mycoplasma pneumoniae-an emerging extra-pulmonary pathogen. Clinical Microbiology and Infection. 2008;14(2):105-117.

    Взятие материала желательно проводить до диагностических и лечебных манипуляций в предполагаемом месте локализации возбудителя. 

    Взятие биологического материала рекомендуется проводить до начала применения лекарственных препаратов (антибактериальных, противовирусных, противопаразитарных). При проведении исследований в целях контроля лечения целесообразно проводить взятие проб на ПЦР-тесты не ранее, чем через 10-14 дней после окончания применения соответствующих препаратов локального действия и не ранее, чем через один месяц после проведения системной терапии. 

    При подготовке пациента к процедуре следует учесть: 

    • за 6 часов до исследования не рекомендуется использовать лекарственные средства для орошения ротоглотки и препараты для рассасывания; 
    • перед проведением исследования не чистить зубы, не использовать жевательную резинку/пастилки для освежения дыхания;  
    • перед началом исследования прополоскать полость рта водой комнатной температуры. 

    Желательно соблюдать все описанные условия, если лечащим врачом не рекомендовано иное. 

    • стойкий длительный кашель на фоне субфебрильной температуры;
    • пневмонии, не поддающиеся стандартной антибиотикотерапии;
    • сочетание клинических признаков поражения дыхательной системы, кожи и слизистых;
    • общение с больными трахеитами, бронхитами в анамнезе (1 – 1,5 нед.);
    • длительный субфебрилитет неясной этиологии.
    Читайте также:  От чего трудно дышать при пневмонии

    Интерпретация результатов

    Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

    Тест качественный. 

    Результат выдаётся в терминах: «обнаружено» или «не обнаружено». 

    «Обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала найден фрагмент ДНК, специфичный для Mycoplasma pneumoniae, инфицирование Mycoplasma pneumoniaе.

    «Не обнаружено»: в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для Mycoplasma pneumoniae, или концентрация ДНК возбудителя в образце ниже границы чувствительности метода.

    Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

    Источник

    Информация об исследовании

    Микоплазмы – это группа одноклеточных микроорганизмов, занимающих промежуточное положение между вирусами и бактериями. Микоплазмы обитают в почве на растениях и даже в гейзерах, но размножаются они лишь внутри клеток организма человека или животного (клетке хозяина). Размножение микоплазм происходит интенсивно за короткий промежуток времени. Малые размеры микоплазм не позволяют им синтезировать все необходимые вещества для своего существования, поэтому для роста и развития они используют ресурсы клетки хозяина (внутриклеточный паразитизм). Обычно микоплазмы заселяют слизистые оболчки животных и человека. Заражения микоплазмами способно вызывать воспаление дыхательных и мочеполовых путей, а также суставов. Заболевания вызванные микоплазмами входят в группу – микоплазмозов. 

    Одним из наиболее распространенных представителей семейства микоплазм является: Micoplasma pneumonia – возбудитель атипичной пневмонии и микоплазменного бронхита (легочной микоплазмоз у взрослых и детей).
    Эпидемиология. Путь передачи – воздушно-капельный.
    Источник инфекции – больной человек и здоровый (бациллоноситель). Обычно наблюдается сезонность – осеннее-зимний период, но сохраняется возможность заражения в течение всего года. Наиболее высока заболеваемость в организованных коллективах и семьях. Формирующийся иммунитет непродолжителен.

    Клинические проявления:
    Инкубационный период: до 3-х недель.

    • Кашель от сухого надрывного со светлой мокротой.
    • Кашель – самый частый симтом при поражении респираторного тракта. У больных с микоплазменной инфекцией присутствует всегда, но среди кашляющих всего 3-10% больных пневмонией.
    • Одышка довольно редкий симптом микоплазменной инфекции, если возникает, то выражена слабо.
    • Лихорадка – не достигает высокой степени выраженности.
    • Симптомы фарингита у 6-59%.
    • Ринорея у 2-35%.
    • Боли в ухе (мирингит) у 5%.
    • Бессимптомный синусит.
    • При физикальном обследовании выявлются невыраженные хрипы (сухие или влажные мелкопузырчатые), перкуторно чаще изменений нет.

    Одним из современных методов объективного обследования микоплазменной инфекции является ПЦР-диагностика.
    ПЦР (полимеразно-цепная реакция) – это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК) любого организма среди огромного количества других участков и многократно размножить его. Метод ПЦР основан на принципе репликации ДНК. Чувствительность метода – 93%, специфичность – 98%.

    Хламидия пневмонии (Chlamidia pnеumoniae) – это патогенные облигатные внутриклеточные грамотрицательные микроорганизмы, которые по своим свойствам определяются как нечто среднее между бактериями и вирусами, паразитирующие на слизистых оболочкках человека и животных. Они также как и бактерии в своём составе содержат ДНК и РНК, а также имеют клеточную стенку, рибосомы, но также как и вирусы могут размножаться лишь находясь внутри клеток хозяина, т.к.для размножения использует ресурсы данной клетки (внутриклеточный паразитизм).
    Эпидемиология.
    Заболевания вызываемые Chlamidia pneumonia – антропонозные инфекционные болезни с поражением органов дыхания. Источник инфекции больные и здоровые (бациллоносители). Путь передачи воздушно- капельный. Возбудитель выделяется во внешнюю среду с отделяемым из носоглотки при кашле, чихании, разговоре.
    Клинические проявления: обычно хламидийная (инфекция) пневмония начинается с респираторного синдрома, проявляющегося трахеобронхитом, назофарингитом, субфебрильной температурой тела, малопродуктивным, мучительным кашлем, скудными аускультативными данными. Характеризуется внелегочными проявлениями: кожными, суставными, гематологическими, гастрэнрологическими, неврологическими и другими. А также нетипичными лабораторными показателями – отсутствие лейкоцитоза и нейтрофильного сдвига в перифирической крови, умеренное повышение СОЭ.
    Для хламидийной и микоплазменной пневмонии характерно затяжное рецидивирующее течение. Одним из методов современной диагностики хламидийной инфекции является-ПЦР.

    Читайте также:  Очаг в легких при пневмонии

    Источник

    [09-071]
    Mycoplasma pneumoniae, ДНК [реал-тайм ПЦР]

    365 руб.

    Это молекулярно-генетическое исследование, позволяющее выявить в исследуемом биоматериале ДНК возбудителя атипичной пневмонии – Mycoplasma pneumoniae.

    Синонимы русские

    Возбудитель микоплазмоза, микоплазма.

    Синонимы английские

    M. pneumoniae, DNA.

    Метод исследования

    Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

    Какой биоматериал можно использовать для исследования?

    Бронхоальвеолярный лаваж, биоптат, венозную кровь, мазок из носоглотки, мокроту, мазок из зева (ротоглотки), плевральную жидкость.

    Общая информация об исследовании

    Mycoplasma pneumonia – причина респираторного микоплазмоза и главный возбудитель атипичной пневмонии (ею вызвано 30 % всех пневмоний). В некоторых случаях она может приводить к развитию менингита, энцефалита, панкреатита и к потере слуха. Инфекция чаще протекает бессимптомно, возбудитель способен длительно персистировать в организме.

    Основной путь передачи – воздушно-капельный. Источником инфекции является больной микоплазмозом или бессимптомный носитель M. pneumoniae. Инкубационный период составляет 2-3 недели. В клинической картине заболевания преобладает лихорадка, общее недомогание, головная боль, а также кашель, который усиливается в течение 1-2 дней и может стать мучительным. В 5-10  % случаев развивается трахеобронхит или пневмония, для которых характерен мучительный кашель с трудноотделяемой мокротой, иногда – с прожилками крови. Иногда инфекция осложняется синдромом Стивенса – Джонсона и другими кожными заболеваниями, асептическим менингитом и менингоэнцефалитом, поперечным миелитом, синдромом Гийена – Барре, полинейропатией, феноменом Рейно, апластической анемией, нарушениями сердечного ритма и проводимости, застойной сердечной недостаточностью, болями в грудной клетке и в суставах.

    Наиболее быстрым и чувствительным методом выявления M. pneumoniae является полимеразная цепная реакция. Принцип метода основан на амплификации (многократном увеличении числа копий) специфичного для данного возбудителя участка ДНК.

    Для чего используется исследование?

    • Для установления причины воспалительных заболеваний нижних дыхательных путей.
    • Для диагностики атипичной пневмонии.
    • Для оценки эффективности проводимой антибактериальной терапии.

    Когда назначается исследование?

    • При воспалительных заболеваниях нижних дыхательных путей, в том числе при подозрении на атипичную пневмонию.

    Что означают результаты?

    Референсные значения: отрицательно.

    Причины положительного результата:

    • микоплазменная инфекция, вызванная M. pneumoniae.

    Причины отрицательного результата:

    • отсутствие микоплазменной инфекции, вызванной M. pneumoniae.

    Поскольку M. pneumoniae способна к персистенции, то выделение ее ДНК в исследуемом биоматериале не может на 100 % свидетельствовать об острой микоплазменной инфекции. Если ДНК M. pneumoniae в исследуемом биоматериале не выявляется, то наличие инфекции, вызванной M. pneumoniae, маловероятно.

    

    Также рекомендуется

    • Mycoplasma pneumoniae, IgM
    • Mycoplasma pneumoniae, IgA
    • Mycoplasma pneumoniae, IgG

    Кто назначает исследование?

    Терапевт, педиатр, врач общей практики, пульмонолог.

    Литература

    • Инфекционные болезни: национальное руководство / Под ред. Н. Д.Ющука, Ю. Я. Венгерова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 1056 с.
    • Baum S. G. Mycoplasma pneumoniae and atypical pneumonia. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J. E., Dolin R (Eds); 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.

    Источник

    Информация об исследовании

    Исследование позволяет обнаружить генетический материал наиболее распространенных возбудителей атипичной пневмонии – хламидофилы и микоплазмы (Mycoplasma pneumoniae и Chlamydophila pneumoniae) в соскобе с ротоглотки. Анализ проводят для диагностики возбудителя атипичной пневмонии в первые 7-10 дней от начала заболевания.

    Пневмония (воспаление легких) – общее название инфекционных заболеваний, поражающих легочную ткань. Это опасное заболевание, чреватое осложнениями и другими фатальными последствиями: по данным ВОЗ, 15% смертей детей в возрасте до 5 лет связаны именно с пневмонией. Среди взрослых риск заболеть у мужчин на 30% выше, чем у женщин.

    Обычно причиной пневмонии у взрослых являются микроорганизмы такие как St. Aureus, str. Pneumonia ,). Грибковые пневмонии больше характерны для людей с врожденными и приобретёнными иммунодефицитами (ВИЧ, прием иммуносупрессантов, наследственные дефициты иммунной системы), тогда как вирусным пневмониям больше подвержены дети.. Некоторые возбудители, такие как хламидии и микоплазмы, имеют особенности, которые защищают их от иммунного ответа и затрудняют лечение –Пневмонии, вызванные Mycoplasma pneumoniae и Chlamydophila pneumoniae называют «атипичными». Атипичную пневмонию можно заподозрить при постепенном поднятии температуры, сухом кашле без отхождения мокроты, першении в горле и выраженных общих симптомах – головной боли, недомогании, слабости, мышечные боли, повышенная потливость. Все эти признаки отличают болезнь от типичной пневмонии, для которой характерны более резкий подъем температуры, кашель с мокротой, наличие хрипов в легких при аускультации. Но данные критерии не всегда имеют строгое долженствование.

    Читайте также:  Односторонняя пневмония что это такое

    Заражение происходит воздушно-капельным путем, источником инфекции выступает больной человек, который наиболее заражен в первые дни от возникновения симптомов.

    Немного подробнее о нетипичных возбудителях:

    Micoplasma pneumoniae — возбудитель атипичной пневмонии и бронхита у детей и взрослых. Это мельчайшие микроорганизмы, у которых нет клеточной стенки и которые паразитируют прямо внутри клеток зараженного человека. Благодаря этому, они устойчивы к лечению наиболее распространенными антибиотиками.

    Chlamidia (Chlamydophila) pneumoniae — патогенный микроорганизм, вызывающий атипичную пневмонию у взрослых, реже – у детей и молодых людей. Они также живут внутри клеток организма, избегая иммунного ответа и действия антибиотиков.

    Для хламидийной и микоплазменной пневмонии характерно затяжное рецидивирующее (возвратное) течение. То есть, после продолжительной болезни возбудитель покоится в организме и через некоторое время вновь может в вызвать заболевание.

    То, что эти микроорганизмы могут долгое время паразитировать в организме, никак себя не проявляя, осложняет диагностику атипичных пневмоний, заболевание может остаться неустановленным. Дополнительные сложности в определении возбудителя возникают из-за невозможности вырастить их на питательной среде, ведь они живут во внутриклеточных условиях.

    Наиболее достоверным методом определение наличия Mycoplasma pneumoniae и Chlamydophila pneumoniae в биоматериале на сегодняшний день является ПЦР-диагностика. Это метод, с помощью которого можно зафиксировать наличие генетического материала возбудителя. (Данная фраза не имеет смысла т.к. ПЦР не поможет подобрать лечение).

    Показания к назначению исследования

    • Диагностика заболевания дыхательных путей, вызванного Chlamydophila pneumoniae (в первые 7-10 дней от начала заболевания).
    • Диагностика заболевания дыхательных путей, вызванного Mycoplasma pneumoniae (в первые 7-10 дней от начала заболевания).
    • Диагностика возбудителя атипичной пневмонии (в первые 7-10 дней от начала заболевания).
    • Обследование лиц с иммунодефицитом и признаками лёгочной инфекции.
    • Диагностика причины пневмонии, устойчивой к лечению антибиотиками.
    • Оценка эффективности лечения.

    Противопоказания и ограничения
    Абсолютных противопоказаний нет.

    Подготовка к исследованию

    • С момента прекращения лечения антибиотиками до взятия биоматериала должно пройти не менее 2 недель;
    • Взятие материала выполняют натощак или не ранее, чем через 2 часа после последнего приёма пищи.

    Материал для исследования
    Соскоб из ротоглотки.

    Метод исследования
    Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени.

    Формат представления результатов, единицы измерения
    Качественный

    Аналитические показатели
    Специфичность обнаружения – 100%.
    Чувствительность анализа – 100 копий ДНК в образце.

    С этим исследованием сдают

    • 20.66.
      Микоплазма пневмонии IgM (п/кол)
    • 20.65.
      Микоплазма пневмонии IgG (п/кол)
    • 19.51.1.
      Микоплазма, хламидофила, ДНК (Mycoplasma pneumoniae, chlamydophila pneumoniae, ПЦР) плазма, кач.
    • 19.52.1.
      Менингококк, гемофильная палочка, стрептококк (Neisseria meningitidis, haemophilus influenzae, streptococcus pneumoniae, ПЦР) плазма, кач.
    • 20.63.
      Хламидия пневмонии IgA (п/кол)
    • 20.61.
      Хламидия пневмонии IgG (п/кол)
    • 20.62.
      Хламидия пневмонии IgM (п/кол)

    Референсные значения (нормы)

    • Не обнаружена

    Интерпретация результата

    Причины положительного результата:

    • Инфицирование C. pneumoniae;
    • Поражение дыхательной системы M. pneumoniae.

    Причины отрицательного результата:

    • Заболевание вызвано не C. pneumoniae, M. pneumoniae.
    • Поздняя фаза инфекционного процесса.

    Использованная литература

    1. <Письмо> ФМБА России от 05.11.2019 N 32-024/758 “О направлении рекомендаций” (вместе с Информационным письмом “Клинико-диагностические аспекты микоплазменной инфекции в очагах. Лечение, профилактика”)
    2. Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний. Методические указания МУК 4.2.3115-13 — Москва, 2014.
    3. Клинические рекомендации: Внебольничная пневмония — 2018.
    4. Инфекционные болезни: национальное руководство / Под ред. Н. Д.Ющука, Ю. Я. Венгерова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 1056 с.
    5. Baum S. G. Mycoplasma pneumoniae and atypical pneumonia. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J. E., Dolin R (Eds); 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
    6. Blasi F, TarsiaP, Aliberti S, Cosentini R, Allegra L. Chlamydia pneumoniae and Mycoplasma pneumoniae. Semin Respir Crit Care Med. 2005 Dec;26(6):617-24.
    7. Бюллютень ВОЗ. Пневмонии
      https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/pneumonia

    Источник