Вакцина против энзоотической пневмонии свиней

06.06.2018

Микоплазменная (или энзоотическая) пневмония, вызванная бактериями Mycoplasma hyopneumoniae (M.hyo), приносит колоссальные убытки свиноводам, существенно снижая темпы роста поросят и ухудшая конверсию корма. Повреждения эпителиальных клеток и ресничек на поверхности трахеи, бронхов и бронхиол у больных животных могут привести к грубым поражениям легких.

Как одна из основных причин комплекса респираторных заболеваний у свиней бактерия M.hyo часто выявляется при смешанных инфекциях с вирусными патогенами, такими как цирковирус свиней типа 2 (ЦВС-2). Ассоциированные с ним болезни свиней (ЦВБС) приводят к прогрессирующей потери веса, высокой смертности и другим тяжелым клиническим последствиям. Виремия и продолжительное выделение вируса являются основными характеристиками ЦВБС.

Из-за серьезных экономических рисков инфицирования животных M.hyo и ЦВС-2 большинство производителей свинины проводят вакцинацию свиней против этих патогенов, которая становится частью программы оздоровления поголовья. Хотя отдельные прививки для каждого возбудителя заболеваний были в свое время обоснованы, недавно появившиеся комбинированные вакцины, содержащие два антигена одновременно, существенно снижают затраты труда на ферме и стресс у животных при иммунизации.

Разработка комбинированного препарата включает в себя множество технических факторов, которые влияют на его эффективность, безопасность (в том числе реакции на месте введения), а также удобство в применении (смешивание в полевых условиях, многократные дозы и др.). Всем этим требованиям как нельзя лучше соответствует «Сувакцин PCV MH» (Fostera™ PCV MH) – готовая комбинированная вакцина, помогающая защитить свиней от ЦВБС и энзоотической пневмонии уже после однократного использования.

Препарат, лицензированный для прививки поросят в трехнедельном возрасте и старше, предназначен для предотвращения:

– ЦВС-2-виремии;
– выделения вируса ЦВС-2 и по-ражения им лимфоидных органов;
– поражения легких от M.hyo.

Фаза иммунизации животных – от трех- до девятинедельного возраста – включала в себя внутримышечное (ВМ) введение 1 мл или 2 мл соответствующего препарата примерно в трехнедельном возрасте в среднюю треть шеи справа или слева при однократной схеме вакцинации (рис. 1, табл.). При двукратной схеме первую дозу вводили справа, вторую – на пятой-шестой неделе жизни в шею слева:

– «Сувакцин PCV MH» (одна доза 2 мл на голову), n=48;
– «Сувакцин PCV MH» (две дозы по 1 мл на голову с интервалом 14 дней), n=48;
– вакцина №1 – комбинированный препарат против ЦВС-2 и M.hyo (одна доза 2 мл на голову, смешанная в одном флаконе перед введением), n=48;
– вакцина №2 – ассоциированный препарат против ЦВС-2 и M.hyo в одном флаконе (две дозы по 2 мл на голову с интервалом 21 день), n=48;
– контроль – введение физиологического раствора по 2 мл на голову ВМ, n=48.

Контрольное заражение проводили начиная с девятинедельного возраста и старше в два этапа:

– интратрахеальное заражение M.hyo в возрасте приблизительно девять недель (через шесть недель после первичной вакцинации);
– внутримышечное и интраназальное заражение ЦВС-2b приблизительно в возрасте 10 недель (через семь недель после первичной вакцинации).

Свиньи наблюдались в течение всего исследования на предмет общего состояния здоровья, клинических признаков дыхательной недостаточности, вялости, истощения и т.д. Основными оцениваемыми параметрами стали поражения легких от M.hyo, виремия ЦВС-2, состояние лимфоидных органов и реакция в месте введения вакцины. Индивидуальные образцы сыворотки крови свиней отбирались во время исследования на 0-й, 28-й, 41-й, 56-й, 63-й и 70-й день. Образцы анализировались методом количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) для обнаружения ЦВС-2-виремии, а также серологически – с использованием иммуноферментного анализа (ИФА) для определения титра антител к M.hyo и ЦВС-2.

Место инъекции у каждого животного для выявления побочных реакций оценивали на первый, четвертый и седьмой день после однократной вакцинации, при двукратной – дополнительно на 15-й, 18-й, 22-й, 23-й, 28-й и 35-й день. Тяжесть реакции просчитывали в баллах в диапазоне от 0 до 3 (0 – отсутствие реакций, 3 – сильные реакции). Любые отклонения от нормы в месте введения препарата осматривались до полного исчезновения. Собранные данные также включали мазки фекалий от каждой свиньи на 48-й, 56-й, 63-й и 70-й день для обнаружения выделения ЦВС-2 с помощью ПЦР. Данные по среднесуточным привесам собирали на протяжении всего исследования на 0-й, 14-й, 21-й, 41-й и 70-й день, хотя оценка производительности животных не входила в задачи этого исследования.

По результатам некропсии (70-й день эксперимента) у каждой свиньи отбирались фрагменты трех лимфатических узлов (трахеобронхиальных, брыжеечных, паховых) и миндалины для гистопатологического обследования на предмет повреждения лимфоидной ткани и выявления антигена ЦВС-2 методом иммуногистохимии (ИГХ). Кроме того, при вскрытии животных производилась

оценка степени поражения легких от M.hyo и их общее состояние.

Все полученные данные проанализированы с помощью соответствующих статистических методов с использованием каждой свиньи как экспериментальной единицы. Клинические наблюдения, сбор данных и посмертное вскрытие проводилось без знания назначения каждой из изучаемых групп. Исследования выполнялись в соответствии с положением компании «Зоэтис» об уходе за животными и их использовании.

Результаты эксперимента

Безопасность

Случаи проявления реакций на месте инъекции представлены на рисунке 2. За исключением группы, где применялась вакцина №2, все остальные привитые животные и контроль имели слабую выраженность местных реакций как при однократной, так и при двукратной инъекции. Поросята, иммунизированные вакциной №2, показали значительно более выраженную реакцию на месте введения, особенно после второй вакцинации. Примечательно, что количество случаев проявления местных поствакцинальных реакций у поросят этой группы было на 85% больше, чем в группе, где применили «Сувакцин PCV MH» (Р≤0,0001). Продолжительность реакций на месте введения также была значительно больше в группе, иммунизированной вакциной №2 (особенно при второй инъекции), чем у животных, получивших другие препараты, – 5,38 дня и 0,27– 0,68 дня соответственно (Р≤0,05).

Как видно на рисунке 3, более 40% поросят после второй инъекции вакциной №2 демонстрировали сильные реакции в месте введения: 3-я степень (отек диаметром более 5 см, болезненность, флюктуация при пальпации и (или) абсцесс). Сравнительный анализ показал, что различные комбинированные вакцины могут существенно различаться по реактогенным свойствам. При этом подтверждено, что «Сувакцин PCV MH» как при однократном, так и при двукратном протоколе вакцинации обладал низкой реактогенностью, не превышающей таковую при введении физиологического раствора.

Защита от M.hyo

Как показал сравнительный анализ, в группах, вакцинированных «Сувакцином PCV MH», средний процент поражения легких от M.hyo составил от 2,8% до 3,5% при двукратной и однократной иммунизации соответственно, что значительно меньше по сравнению с контролем 15,7% (Р≤0,05) (рис. 4). Эта разница представляла собой значительное снижение риска развития поражений в легких – примерно на 80% для «Сувакцина PCV MH» по сравнению с контрольной группой.

Сравнительный анализ поражений, характерных для ЦВБС по трем гистологическим параметрам, включая гистиоцитарную инфильтрацию, лимфоидное истощение и ИГХ, показывает, что все вакцинированные свиньи независимо от группы на гистологическом уровне имели значительно меньше отклонений, связанных с ЦВС-2, чем в контроле (рис. 6).