Пцр хламидия пневмонии и микоплазма пневмонии

Информация об исследовании

Исследование позволяет обнаружить генетический материал наиболее распространенных возбудителей атипичной пневмонии – хламидофилы и микоплазмы (Mycoplasma pneumoniae и Chlamydophila pneumoniae) в соскобе с ротоглотки. Анализ проводят для диагностики возбудителя атипичной пневмонии в первые 7-10 дней от начала заболевания.

Показания к назначению исследования

• Диагностика заболевания дыхательных путей, вызванного Chlamydophila pneumoniae (в первые 7-10 дней от начала заболевания).
• Диагностика заболевания дыхательных путей, вызванного Mycoplasma pneumoniae (в первые 7-10 дней от начала заболевания).
• Диагностика возбудителя атипичной пневмонии (в первые 7-10 дней от начала заболевания).
• Обследование лиц с иммунодефицитом и признаками лёгочной инфекции.
• Диагностика причины пневмонии, устойчивой к лечению антибиотиками.
• Оценка эффективности лечения.

Противопоказания и ограничения
Абсолютных противопоказаний нет.

Подготовка к исследованию

• С момента прекращения лечения антибиотиками до взятия биоматериала должно пройти не менее 2 недель;
• Взятие материала выполняют натощак или не ранее, чем через 2 часа после последнего приёма пищи.

Материал для исследования
Соскоб из ротоглотки.

Метод исследования
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени.

Формат представления результатов, единицы измерения
Качественный

Аналитические показатели
Специфичность обнаружения – 100%.
Чувствительность анализа – 100 копий ДНК в образце.

С этим исследованием сдают

• 20.66.
  Микоплазма пневмонии IgM (п/кол)
• 20.65.
  Микоплазма пневмонии IgG (п/кол)
• 19.51.1.
  Микоплазма, хламидофила, ДНК (Mycoplasma pneumoniae, chlamydophila pneumoniae, ПЦР) плазма, кач.
• 19.52.1.
  Менингококк, гемофильная палочка, стрептококк (Neisseria meningitidis, haemophilus influenzae, streptococcus pneumoniae, ПЦР) плазма, кач.
• 20.63.
  Хламидия пневмонии IgA (п/кол)
• 20.61.
  Хламидия пневмонии IgG (п/кол)
• 20.62.
  Хламидия пневмонии IgM (п/кол)

Референсные значения (нормы)

• Не обнаружена

Интерпретация результата

Причины положительного результата:

• Инфицирование C. pneumoniae;
• Поражение дыхательной системы M. pneumoniae.

Причины отрицательного результата:

• Заболевание вызвано не C. pneumoniae, M. pneumoniae.
• Поздняя фаза инфекционного процесса.

Использованная литература

1. <Письмо> ФМБА России от 05.11.2019 N 32-024/758 “О направлении рекомендаций” (вместе с Информационным письмом “Клинико-диагностические аспекты микоплазменной инфекции в очагах. Лечение, профилактика”)
2. Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний. Методические указания МУК 4.2.3115-13 — Москва, 2014.
3. Клинические рекомендации: Внебольничная пневмония — 2018.
4. Инфекционные болезни: национальное руководство / Под ред. Н. Д.Ющука, Ю. Я. Венгерова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 1056 с.
5. Baum S. G. Mycoplasma pneumoniae and atypical pneumonia. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J. E., Dolin R (Eds); 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
6. Blasi F, TarsiaP, Aliberti S, Cosentini R, Allegra L. Chlamydia pneumoniae and Mycoplasma pneumoniae. Semin Respir Crit Care Med. 2005 Dec;26(6):617-24.
7. Бюллютень ВОЗ. Пневмонии
   https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/pneumonia

Mycoplasma pneumoniae (микоплазма пневмония) относится к классу Mollicutes, порядку Mycoplasmatales, семейству Mycoplasmataceae и роду Mycoplasma, является мембрано-ассоциированным микроорганизмом, способным к саморепликации и длительной персистенции в восприимчивом организме. Chlamydophila pneumoniae, согласно последней классификации, относится к семейству Chlamydiaceae, роду Chlamydophila, является облигатным внутриклеточным паразитом слизистой оболочки человека и животных. Цикл развития Chlamydophila pneumoniae состоит из чередования функционально и морфологически различных форм – элементарных и ретикулярных телец. Элементарные тельца метаболически малоактивны, но обладают инфекционными свойствами и способны проникать в чувствительную клетку. Ретикулярные тельца метаболически активны, обеспечивают репродукцию микроорганизма и не обладают инфекционными свойствами. M.pneumoniae и C.pneumoniae, по мнению ряда исследователей, могут длительно персистировать в клетках эпителия и лимфоглоточном кольце. Источником респираторных инфекций, вызванных M.pneumoniae и C.pneumoniae, могут быть больные и носители данных микроорганизмов в респираторном тракте. Периодически каждые 3–5 лет наблюдаются эпидемические подъемы заболеваемости, которые длятся несколько месяцев. ОРЗ, вызванные M.pneumoniae и C. pneumoniae, встречаются чаще у школьников, студентов и военнослужащих, а также у лиц с иммунодефицитом. Часто описываются семейные вспышки. Инкубационный период длится 1–4 недели. Микоплазменные пневмонии по данным ВОЗ составляют 10–20% от общего числа пневмоний. Заболевания, вызванные данными возбудителями, не поддаются лечению антибактериальными препаратами широкого спектра действия. Летальность при микоплазменной пневмонии составляет 1,4%. Данные культуральных исследований свидетельствуют о случаях носительства C.pneumoniae в лейкоцитах периферической крови (до 25% у взрослых), повышенный уровень АТ к C.pneumonia обнаруживается у 47,7% доноров крови. Носительство C.pneumoniae в эпителии верхних дыхательных путей составляет 1–2% у взрослых и 4–6% у детей без симптомов ОРЗ.

Показания к обследованию. Остро возникшее заболевание с локальными симптомами поражения верхних или нижних дыхательных путей: фарингит, гриппоподобные заболевания, синусит, бронхит, пневмония.

Дифференциальная диагностика. ОРЗ вирусной природы, коклюшная инфекция.

Материал для исследований

• Мазки из носоглотки – обнаружение АГ;
• мазки из носоглотки и ротоглотки – выявление ДНК микроорганизмов (поражение верхних дыхательных путей);
• мокрота, плевральная жидкость, аспираты из зева и трахеи, БАЛ – выявление ДНК микроорганизмов (поражение нижних дыхательных путей);
• сыворотка крови – обнаружение АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика заболеваний включает культуральное исследование, обнаружение ДНК M.pneumoniae и C.pneumoniae, обнаружение АГ C.pneumoniae, обнаружение специфических АТ к M.pneumoniae и C.pneumoniae.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Культуральное исследование обладает низкой чувствительностью (40–60%) и длительностью (10–28 дней), в связи с чем для рутинной диагностики практически не используется.

Наиболее специфичным методом прямой диагностики названных патогенов является выявление их ДНК методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации который позволяет избежать перекрестных реакций с непатогенными для человека микоплазмами (M.salivarium, M.orale, M.buccae), в норме колонизирующими ротовую полость человека.

Для обнаружения АГ C.pneumoniae применяют методы МФА (РИФ), ИФА. Диагностическая ценность этих исследований невелика.

Для обнаружение специфических АТ к M.pneumoniae и C.pneumoniae применяют ИФА (качественные, полуколичественные и количественные тесты), РСК, МИФ. Наиболее чувствительным является выявление АТ при применении МИФ, позволяющее идентифицировать специфические иммуноглобулины G, А и М. С целью исключения ложноположительных результатов обнаружения IgM, этот показатель определяют после обнаружения повышенного уровня IgG. При таких исследованиях наибольшую специфичность имеют количественные тесты с одновременным исследованием двух образцов крови, взятых в динамике с интервалом 3–4 недели (парные сыворотки). Метод РСК, использовавшийся ранее для диагностики инфекций, вызванных C.pneumoniae, выявлял АТ к роду Chlamydophila с чувствительностью не более 30% и не позволял дифференцировать C.trachomatis, C.psittaci и C.рneumoniae.

Показания к применению различных лабораторных исследований. С целью быстрой этиологической диагностики используется выявление ДНК микроорганизмов методом ПЦР. Выявление АТ применяют для ретроспективной диагностики и ретроспективного анализа природы эпидемических вспышек.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Для диагностики заболеваний нижних дыхательных путей (бронхиты, пневмонии) мазки из носоглотки и ротоглотки использовать не рекомендуется в связи с низкой информативностью исследования данного материала. При определении титра АТ в образцах крови, взятых в динамике с интервалом 3–4 недели (парные сыворотки), диагностически значимым считается его нарастание не менее чем в 4 раза во второй сыворотке. При диагностике заболеваний, вызванных M.pneumoniae, следует учитывать, что концентрация специфических АТ к патогену при ОРЗ становится максимальной через 3–4 недели от начала болезни, затем она быстро падает ниже диагностически значимого уровня; у 30% пациентов с пневмонией, вызванной названным микроорганизмом, уровень специфических АТ не поднимается выше диагностически значимого, т. е. отрицательный результат исследования не исключает наличия инфекции. Возможно ложноположительные результаты определения АТ- IgM к C.pneumoniae в случаях присутствия ревматоидного фактора, особенно у пожилых пациентов. В связи с недостаточной чувствительностью тестов для выявления АГ методом РИФ получение отрицательных результатов при их использовании не исключает возможного инфицирования.

Для диагностики генерализованной инфекции, вызванной C. pneumoniaе.

Когда назначается исследование?