Антитела хламидии пневмонии и микоплазма пневмонии

• Приём, исследование биоматериала
• Описание

Приём и исследование биоматериала

Приём материала

• Можно сдать в отделении Гемотест — 154 отделения
• Можно сдать анализ дома

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция

Подробное описание исследования

Микоплазмы – это группа одноклеточных микроорганизмов, занимающих промежуточное положение между вирусами и бактериями. Микоплазмы обитают в почве на растениях и даже в гейзерах, но размножаются они лишь внутри клеток организма человека или животного (клетке хозяина). Размножение микоплазм происходит интенсивно за короткий промежуток времени. Малые размеры микоплазм не позволяют им синтезировать все необходимые вещества для своего существования, поэтому для роста и развития они используют ресурсы клетки хозяина (внутриклеточный паразитизм). Обычно микоплазмы заселяют слизистые оболчки животных и человека. Заражения микоплазмами способно вызывать воспаление дыхательных и мочеполовых путей, а также суставов. Заболевания вызванные микоплазмами входят в группу – микоплазмозов. 
Одним из наиболее распространенных представителей семейства микоплазм является: Micoplasma pneumonia – возбудитель атипичной пневмонии и микоплазменного бронхита (легочной микоплазмоз у взрослых и детей). 
Эпидемиология. Путь передачи – воздушно-капельный. 
Источник инфекции – больной человек и здоровый (бациллоноситель). Обычно наблюдается сезонность – осеннее-зимний период, но сохраняется возможность заражения в течение всего года. Наиболее высока заболеваемость в организованных коллективах и семьях. Формирующийся иммунитет непродолжителен. 

Клинические проявления: 
Инкубационный период: до 3-х недель. 

• Кашель от сухого надрывного со светлой мокротой.
• Кашель – самый частый симтом при поражении респираторного тракта. У больных с микоплазменной инфекцией присутствует всегда, но среди кашляющих всего 3-10% больных пневмонией.
• Одышка довольно редкий симптом микоплазменной инфекции, если возникает, то выражена слабо.
• Лихорадка – не достигает высокой степени выраженности.
• Симптомы фарингита у 6-59%.
• Ринорея у 2-35%.
• Боли в ухе (мирингит) у 5%.
• Бессимптомный синусит.
• При физикальном обследовании выявлются невыраженные хрипы (сухие или влажные мелкопузырчатые), перкуторно чаще изменений нет.

Одним из современных методов объективного обследования микоплазменной инфекции является ПЦР-диагностика. 
ПЦР (полимеразно-цепная реакция) – это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК) любого организма среди огромного количества других участков и многократно размножить его. Метод ПЦР основан на принципе репликации ДНК. Чувствительность метода – 93%, специфичность – 98%. 

Хламидия пневмонии (Chlamidia pnеumoniae) – это патогенные облигатные внутриклеточные грамотрицательные микроорганизмы, которые по своим свойствам определяются как нечто среднее между бактериями и вирусами, паразитирующие на слизистых оболочкках человека и животных. Они также как и бактерии в своём составе содержат ДНК и РНК, а также имеют клеточную стенку, рибосомы, но также как и вирусы могут размножаться лишь находясь внутри клеток хозяина, т.к.для размножения использует ресурсы данной клетки (внутриклеточный паразитизм). 
Эпидемиология. 
Заболевания вызываемые Chlamidia pneumonia – антропонозные инфекционные болезни с поражением органов дыхания. Источник инфекции больные и здоровые (бациллоносители). Путь передачи воздушно- капельный. Возбудитель выделяется во внешнюю среду с отделяемым из носоглотки при кашле, чихании, разговоре. 
Клинические проявления: обычно хламидийная (инфекция) пневмония начинается с респираторного синдрома, проявляющегося трахеобронхитом, назофарингитом, субфебрильной температурой тела, малопродуктивным, мучительным кашлем, скудными аускультативными данными. Характеризуется внелегочными проявлениями: кожными, суставными, гематологическими, гастрэнрологическими, неврологическими и другими. А также нетипичными лабораторными показателями – отсутствие лейкоцитоза и нейтрофильного сдвига в перифирической крови, умеренное повышение СОЭ. 
Для хламидийной и микоплазменной пневмонии характерно затяжное рецидивирующее течение. Одним из методов современной диагностики хламидийной инфекции является-ПЦР.

Mycoplasma pneumoniae (микоплазма пневмония) относится к классу Mollicutes, порядку Mycoplasmatales, семейству Mycoplasmataceae и роду Mycoplasma, является мембрано-ассоциированным микроорганизмом, способным к саморепликации и длительной персистенции в восприимчивом организме. Chlamydophila pneumoniae, согласно последней классификации, относится к семейству Chlamydiaceae, роду Chlamydophila, является облигатным внутриклеточным паразитом слизистой оболочки человека и животных. Цикл развития Chlamydophila pneumoniae состоит из чередования функционально и морфологически различных форм – элементарных и ретикулярных телец. Элементарные тельца метаболически малоактивны, но обладают инфекционными свойствами и способны проникать в чувствительную клетку. Ретикулярные тельца метаболически активны, обеспечивают репродукцию микроорганизма и не обладают инфекционными свойствами. M.pneumoniae и C.pneumoniae, по мнению ряда исследователей, могут длительно персистировать в клетках эпителия и лимфоглоточном кольце. Источником респираторных инфекций, вызванных M.pneumoniae и C.pneumoniae, могут быть больные и носители данных микроорганизмов в респираторном тракте. Периодически каждые 3–5 лет наблюдаются эпидемические подъемы заболеваемости, которые длятся несколько месяцев. ОРЗ, вызванные M.pneumoniae и C. pneumoniae, встречаются чаще у школьников, студентов и военнослужащих, а также у лиц с иммунодефицитом. Часто описываются семейные вспышки. Инкубационный период длится 1–4 недели. Микоплазменные пневмонии по данным ВОЗ составляют 10–20% от общего числа пневмоний. Заболевания, вызванные данными возбудителями, не поддаются лечению антибактериальными препаратами широкого спектра действия. Летальность при микоплазменной пневмонии составляет 1,4%. Данные культуральных исследований свидетельствуют о случаях носительства C.pneumoniae в лейкоцитах периферической крови (до 25% у взрослых), повышенный уровень АТ к C.pneumonia обнаруживается у 47,7% доноров крови. Носительство C.pneumoniae в эпителии верхних дыхательных путей составляет 1–2% у взрослых и 4–6% у детей без симптомов ОРЗ.

Показания к обследованию. Остро возникшее заболевание с локальными симптомами поражения верхних или нижних дыхательных путей: фарингит, гриппоподобные заболевания, синусит, бронхит, пневмония.

Дифференциальная диагностика. ОРЗ вирусной природы, коклюшная инфекция.

Материал для исследований

• Мазки из носоглотки – обнаружение АГ;
• мазки из носоглотки и ротоглотки – выявление ДНК микроорганизмов (поражение верхних дыхательных путей);
• мокрота, плевральная жидкость, аспираты из зева и трахеи, БАЛ – выявление ДНК микроорганизмов (поражение нижних дыхательных путей);
• сыворотка крови – обнаружение АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика заболеваний включает культуральное исследование, обнаружение ДНК M.pneumoniae и C.pneumoniae, обнаружение АГ C.pneumoniae, обнаружение специфических АТ к M.pneumoniae и C.pneumoniae.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Культуральное исследование обладает низкой чувствительностью (40–60%) и длительностью (10–28 дней), в связи с чем для рутинной диагностики практически не используется.

Наиболее специфичным методом прямой диагностики названных патогенов является выявление их ДНК методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации который позволяет избежать перекрестных реакций с непатогенными для человека микоплазмами (M.salivarium, M.orale, M.buccae), в норме колонизирующими ротовую полость человека.

Для обнаружения АГ C.pneumoniae применяют методы МФА (РИФ), ИФА. Диагностическая ценность этих исследований невелика.

Для обнаружение специфических АТ к M.pneumoniae и C.pneumoniae применяют ИФА (качественные, полуколичественные и количественные тесты), РСК, МИФ. Наиболее чувствительным является выявление АТ при применении МИФ, позволяющее идентифицировать специфические иммуноглобулины G, А и М. С целью исключения ложноположительных результатов обнаружения IgM, этот показатель определяют после обнаружения повышенного уровня IgG. При таких исследованиях наибольшую специфичность имеют количественные тесты с одновременным исследованием двух образцов крови, взятых в динамике с интервалом 3–4 недели (парные сыворотки). Метод РСК, использовавшийся ранее для диагностики инфекций, вызванных C.pneumoniae, выявлял АТ к роду Chlamydophila с чувствительностью не более 30% и не позволял дифференцировать C.trachomatis, C.psittaci и C.рneumoniae.

Показания к применению различных лабораторных исследований. С целью быстрой этиологической диагностики используется выявление ДНК микроорганизмов методом ПЦР. Выявление АТ применяют для ретроспективной диагностики и ретроспективного анализа природы эпидемических вспышек.

Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Для диагностики заболеваний нижних дыхательных путей (бронхиты, пневмонии) мазки из носоглотки и ротоглотки использовать не рекомендуется в связи с низкой информативностью исследования данного материала. При определении титра АТ в образцах крови, взятых в динамике с интервалом 3–4 недели (парные сыворотки), диагностически значимым считается его нарастание не менее чем в 4 раза во второй сыворотке. При диагностике заболеваний, вызванных M.pneumoniae, следует учитывать, что концентрация специфических АТ к патогену при ОРЗ становится максимальной через 3–4 недели от начала болезни, затем она быстро падает ниже диагностически значимого уровня; у 30% пациентов с пневмонией, вызванной названным микроорганизмом, уровень специфических АТ не поднимается выше диагностически значимого, т. е. отрицательный результат исследования не исключает наличия инфекции. Возможно ложноположительные результаты определения АТ- IgM к C.pneumoniae в случаях присутствия ревматоидного фактора, особенно у пожилых пациентов. В связи с недостаточной чувствительностью тестов для выявления АГ методом РИФ получение отрицательных результатов при их использовании не исключает возможного инфицирования.