Анализ на хламидии и микоплазмы пневмонии
Информация об исследовании
Микоплазмы – это группа одноклеточных микроорганизмов, занимающих промежуточное положение между вирусами и бактериями. Микоплазмы обитают в почве на растениях и даже в гейзерах, но размножаются они лишь внутри клеток организма человека или животного (клетке хозяина). Размножение микоплазм происходит интенсивно за короткий промежуток времени. Малые размеры микоплазм не позволяют им синтезировать все необходимые вещества для своего существования, поэтому для роста и развития они используют ресурсы клетки хозяина (внутриклеточный паразитизм). Обычно микоплазмы заселяют слизистые оболчки животных и человека. Заражения микоплазмами способно вызывать воспаление дыхательных и мочеполовых путей, а также суставов. Заболевания вызванные микоплазмами входят в группу – микоплазмозов.
Одним из наиболее распространенных представителей семейства микоплазм является: Micoplasma pneumonia – возбудитель атипичной пневмонии и микоплазменного бронхита (легочной микоплазмоз у взрослых и детей).
Эпидемиология. Путь передачи – воздушно-капельный.
Источник инфекции – больной человек и здоровый (бациллоноситель). Обычно наблюдается сезонность – осеннее-зимний период, но сохраняется возможность заражения в течение всего года. Наиболее высока заболеваемость в организованных коллективах и семьях. Формирующийся иммунитет непродолжителен.
Клинические проявления:
Инкубационный период: до 3-х недель.
- Кашель от сухого надрывного со светлой мокротой.
- Кашель – самый частый симтом при поражении респираторного тракта. У больных с микоплазменной инфекцией присутствует всегда, но среди кашляющих всего 3-10% больных пневмонией.
- Одышка довольно редкий симптом микоплазменной инфекции, если возникает, то выражена слабо.
- Лихорадка – не достигает высокой степени выраженности.
- Симптомы фарингита у 6-59%.
- Ринорея у 2-35%.
- Боли в ухе (мирингит) у 5%.
- Бессимптомный синусит.
- При физикальном обследовании выявлются невыраженные хрипы (сухие или влажные мелкопузырчатые), перкуторно чаще изменений нет.
Одним из современных методов объективного обследования микоплазменной инфекции является ПЦР-диагностика.
ПЦР (полимеразно-цепная реакция) – это метод, который позволяет найти в исследуемом клиническом материале небольшой участок генетической информации (ДНК) любого организма среди огромного количества других участков и многократно размножить его. Метод ПЦР основан на принципе репликации ДНК. Чувствительность метода – 93%, специфичность – 98%.
Хламидия пневмонии (Chlamidia pnеumoniae) – это патогенные облигатные внутриклеточные грамотрицательные микроорганизмы, которые по своим свойствам определяются как нечто среднее между бактериями и вирусами, паразитирующие на слизистых оболочкках человека и животных. Они также как и бактерии в своём составе содержат ДНК и РНК, а также имеют клеточную стенку, рибосомы, но также как и вирусы могут размножаться лишь находясь внутри клеток хозяина, т.к.для размножения использует ресурсы данной клетки (внутриклеточный паразитизм).
Эпидемиология.
Заболевания вызываемые Chlamidia pneumonia – антропонозные инфекционные болезни с поражением органов дыхания. Источник инфекции больные и здоровые (бациллоносители). Путь передачи воздушно- капельный. Возбудитель выделяется во внешнюю среду с отделяемым из носоглотки при кашле, чихании, разговоре.
Клинические проявления: обычно хламидийная (инфекция) пневмония начинается с респираторного синдрома, проявляющегося трахеобронхитом, назофарингитом, субфебрильной температурой тела, малопродуктивным, мучительным кашлем, скудными аускультативными данными. Характеризуется внелегочными проявлениями: кожными, суставными, гематологическими, гастрэнрологическими, неврологическими и другими. А также нетипичными лабораторными показателями – отсутствие лейкоцитоза и нейтрофильного сдвига в перифирической крови, умеренное повышение СОЭ.
Для хламидийной и микоплазменной пневмонии характерно затяжное рецидивирующее течение. Одним из методов современной диагностики хламидийной инфекции является-ПЦР.
Источник
Информация об исследовании
Исследование позволяет обнаружить генетический материал наиболее распространенных возбудителей атипичной пневмонии – хламидофилы и микоплазмы (Mycoplasma pneumoniae и Chlamydophila pneumoniae) в соскобе с ротоглотки. Анализ проводят для диагностики возбудителя атипичной пневмонии в первые 7-10 дней от начала заболевания.
Пневмония (воспаление легких) – общее название инфекционных заболеваний, поражающих легочную ткань. Это опасное заболевание, чреватое осложнениями и другими фатальными последствиями: по данным ВОЗ, 15% смертей детей в возрасте до 5 лет связаны именно с пневмонией. Среди взрослых риск заболеть у мужчин на 30% выше, чем у женщин.
Обычно причиной пневмонии у взрослых являются микроорганизмы такие как St. Aureus, str. Pneumonia ,). Грибковые пневмонии больше характерны для людей с врожденными и приобретёнными иммунодефицитами (ВИЧ, прием иммуносупрессантов, наследственные дефициты иммунной системы), тогда как вирусным пневмониям больше подвержены дети.. Некоторые возбудители, такие как хламидии и микоплазмы, имеют особенности, которые защищают их от иммунного ответа и затрудняют лечение –Пневмонии, вызванные Mycoplasma pneumoniae и Chlamydophila pneumoniae называют «атипичными». Атипичную пневмонию можно заподозрить при постепенном поднятии температуры, сухом кашле без отхождения мокроты, першении в горле и выраженных общих симптомах – головной боли, недомогании, слабости, мышечные боли, повышенная потливость. Все эти признаки отличают болезнь от типичной пневмонии, для которой характерны более резкий подъем температуры, кашель с мокротой, наличие хрипов в легких при аускультации. Но данные критерии не всегда имеют строгое долженствование.
Заражение происходит воздушно-капельным путем, источником инфекции выступает больной человек, который наиболее заражен в первые дни от возникновения симптомов.
Немного подробнее о нетипичных возбудителях:
Micoplasma pneumoniae — возбудитель атипичной пневмонии и бронхита у детей и взрослых. Это мельчайшие микроорганизмы, у которых нет клеточной стенки и которые паразитируют прямо внутри клеток зараженного человека. Благодаря этому, они устойчивы к лечению наиболее распространенными антибиотиками.
Chlamidia (Chlamydophila) pneumoniae — патогенный микроорганизм, вызывающий атипичную пневмонию у взрослых, реже – у детей и молодых людей. Они также живут внутри клеток организма, избегая иммунного ответа и действия антибиотиков.
Для хламидийной и микоплазменной пневмонии характерно затяжное рецидивирующее (возвратное) течение. То есть, после продолжительной болезни возбудитель покоится в организме и через некоторое время вновь может в вызвать заболевание.
То, что эти микроорганизмы могут долгое время паразитировать в организме, никак себя не проявляя, осложняет диагностику атипичных пневмоний, заболевание может остаться неустановленным. Дополнительные сложности в определении возбудителя возникают из-за невозможности вырастить их на питательной среде, ведь они живут во внутриклеточных условиях.
Наиболее достоверным методом определение наличия Mycoplasma pneumoniae и Chlamydophila pneumoniae в биоматериале на сегодняшний день является ПЦР-диагностика. Это метод, с помощью которого можно зафиксировать наличие генетического материала возбудителя. (Данная фраза не имеет смысла т.к. ПЦР не поможет подобрать лечение).
Показания к назначению исследования
- Диагностика заболевания дыхательных путей, вызванного Chlamydophila pneumoniae (в первые 7-10 дней от начала заболевания).
- Диагностика заболевания дыхательных путей, вызванного Mycoplasma pneumoniae (в первые 7-10 дней от начала заболевания).
- Диагностика возбудителя атипичной пневмонии (в первые 7-10 дней от начала заболевания).
- Обследование лиц с иммунодефицитом и признаками лёгочной инфекции.
- Диагностика причины пневмонии, устойчивой к лечению антибиотиками.
- Оценка эффективности лечения.
Противопоказания и ограничения
Абсолютных противопоказаний нет.
Подготовка к исследованию
- С момента прекращения лечения антибиотиками до взятия биоматериала должно пройти не менее 2 недель;
- Взятие материала выполняют натощак или не ранее, чем через 2 часа после последнего приёма пищи.
Материал для исследования
Соскоб из ротоглотки.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени.
Формат представления результатов, единицы измерения
Качественный
Аналитические показатели
Специфичность обнаружения – 100%.
Чувствительность анализа – 100 копий ДНК в образце.
С этим исследованием сдают
- 20.66.
Микоплазма пневмонии IgM (п/кол) - 20.65.
Микоплазма пневмонии IgG (п/кол) - 19.51.1.
Микоплазма, хламидофила, ДНК (Mycoplasma pneumoniae, chlamydophila pneumoniae, ПЦР) плазма, кач. - 19.52.1.
Менингококк, гемофильная палочка, стрептококк (Neisseria meningitidis, haemophilus influenzae, streptococcus pneumoniae, ПЦР) плазма, кач. - 20.63.
Хламидия пневмонии IgA (п/кол) - 20.61.
Хламидия пневмонии IgG (п/кол) - 20.62.
Хламидия пневмонии IgM (п/кол)
Референсные значения (нормы)
- Не обнаружена
Интерпретация результата
Причины положительного результата:
- Инфицирование C. pneumoniae;
- Поражение дыхательной системы M. pneumoniae.
Причины отрицательного результата:
- Заболевание вызвано не C. pneumoniae, M. pneumoniae.
- Поздняя фаза инфекционного процесса.
Использованная литература
- <Письмо> ФМБА России от 05.11.2019 N 32-024/758 “О направлении рекомендаций” (вместе с Информационным письмом “Клинико-диагностические аспекты микоплазменной инфекции в очагах. Лечение, профилактика”)
- Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний. Методические указания МУК 4.2.3115-13 — Москва, 2014.
- Клинические рекомендации: Внебольничная пневмония — 2018.
- Инфекционные болезни: национальное руководство / Под ред. Н. Д.Ющука, Ю. Я. Венгерова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 1056 с.
- Baum S. G. Mycoplasma pneumoniae and atypical pneumonia. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J. E., Dolin R (Eds); 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
- Blasi F, TarsiaP, Aliberti S, Cosentini R, Allegra L. Chlamydia pneumoniae and Mycoplasma pneumoniae. Semin Respir Crit Care Med. 2005 Dec;26(6):617-24.
- Бюллютень ВОЗ. Пневмонии
https://www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/pneumonia
Источник
Хламидии представляют собой целый класс возбудителей, вызывающих самые разные болезни. Например, орнитоз – заболевание, протекающее в форме, близкой к воспалению легких. Возбудителями орнитоза являются стафилококки и стрептококки – разновидность хламидий, встречающихся у диких и домашних птиц. Инфицирование происходит воздушно-капельным путем или через рот, после соприкосновения с перьями или поверхностями, на которых находились больные птицы. Еще одним распространенным носителем хламидийной инфекции являются кошки, передающие инфекцию через царапины.
Хламидиоз – урогенитальное инфекционное заболевание, передающееся половым путем. Больные хламидийной инфекцией испытывают боли и зуд в мочеиспускательном канале и половых органах, тянущие боли в нижней части живота и паховой области. Хламидиоз требует незамедлительного лечения. Несвоевременная или некорректная терапия хламидийной инфекции может вызвать различные осложнения, начиная от возникновения воспалительных очагов на коже и воспалений внутренних органов, заканчивая бесплодием.
Хламидии представляют огромную угрозу для протекания беременности, повышая риск выкидыша, способствуя преждевременным родам и инфицированию плода.
В «радиус поражения» микоплазмов входит не только мочеполовой тракт, но и дыхательная система. При заражении микоплазмами у больного могут наблюдаются симптомы воспалительных процессов в горле, легких и бронхах.
Несмотря на то, что обе инфекции передаются при непосредственных контактах, некоторое количество внутриклеточных паразитов содержится и в здоровых организмах. Если иммунитет достаточно силен, то они не представляют никакой угрозы здоровью. Однако при ослаблении иммунитета хламидии и микоплазмы немедленно дадут о себе знать, причем в самой неожиданной форме. Многие мамы удивляются, когда измученному регулярными ОРВИ ребенку врач назначает анализ крови на хламидии и микоплазму pneumonia. «Какое отношение к ребенку могут иметь половые инфекции?»- подумает мама. Тем не менее, именно эта разновидность этих внутриклеточных паразитов – пневмоническая – является возбудителем хронических заболеваний верхних и нижних дыхательных отделов – микоплазменного бронхита, атипичной пневмонии и др. Только полное или частичное (до состояния иммунного контроля) избавление от пневмонической микоплазмы приведет к долгожданному исцелению.
Основным инструментом для диагностики хламидиозов и микоплазмозов является анализ крови. В настоящее время наиболее эффективными способами выполнения такого анализа являются метод ИФА и метод ПЦР.
Метод ИФА исследует антитела, выработанные организмом для борьбы с внутриклеточными паразитами. Материалом для выполнения анализа является кровяная сыворотка, взятая из вены. Для достоверности результатов исследования необходимо сдавать анализ натощак. Расшифровка анализа позволяет определить вид инфекции и оценить динамику развития заболевания. Накопленная статистика результатов анализов, выполненных методом ИФА, будет показательной при оценке эффективности лечения.
Расшифровка анализа методом ИФА
В начале заболевания анализ крови показывает наличие антител IgM. Продолжительность начальной стадии заболевания зависит от типа инфекции и индивидуальных особенностей иммунитета человека, но обычно составляет от одной до трех недель после заражения. При обнаружении в анализе крови на хламидиоз или микоплазмоз антител IgM врач диагностирует острую фазу или рецидив хронического заболевания.
Спустя месяц после заражения клеточными паразитами в организме начинают вырабатываться антитела IgА. В последнюю очередь (в среднем – спустя порядка четырех недель) в результатах анализа кровипоявляются антитела IgM. Снижение количества этих антител является показателем эффективности лечения.
Таким образом, в расшифровке анализа выводятся следующие показатели: anti-Chlamydia trahomatis IgM, anti-Chlamydia trahomatis IgA, anti-Chlamydia trahomatis IgG, anti-Chlamydia pneumonia IgM, anti-Chlamydia pneumonia IgA, anti-Chlamydia pneumonia IgG и anti- Mycoplasma trahomatis IgM, anti- Mycoplasma trahomatis IgA, anti- Mycoplasma trahomatis IgG, anti- Mycoplasma pneumonia IgM, anti- Mycoplasma pneumonia IgA, anti- Mycoplasma pneumonia IgG.
Расшифровка анализа методом ЦПР
Метод ПЦР (полиразмерной цепной реакции) в настоящее время признан наиболее эффективным для диагностики инфекционных заболеваний. Основанный на микробиологическом анализе, он работает с генетическим материалом, тем самым обеспечивая самую высокую чувствительность исследования. Достаточно минимальных количеств биологического материала для того, чтобы диагностировать тип инфекционного возбудителя, оценить его количество и локализацию. В расшифровке анализа вы увидите показатели Chlamydia trachomatis ДНК, Chlamydia pneumonia ДНК, Mycoplasma trachomatis ДНК, Mycoplasma pneumonia ДНК.
Как вы понимаете, несмотря на достижения в области молекулярной биологии и медицины, результаты анализов могут не вполне адекватно отражать картину происходящего. А ситуации, при которых результаты высокоточных анализов на одни и те же показатели значительно расходятся, могут поставить в тупик даже настоящего профессионала. Так, при диагностике хламидиоза и микоплазмоза результаты анализов крови, выполненные с помощью методик ИФА и ПЦР, могут давать разные результаты. Это может происходить по следующим причинам.
После выздоровления в сыворотке крови длительное время могут сохраняться антитела IgG. Они могут ошибочно трактоваться как признаки наличия инфекции в организме. В то же время анализ крови методом ПЦР, направленный на обнаружение ДНК отсутствующих фактически возбудителей, даст отрицательный ответ.
Кроме того, методы ИФА и ПЦР по-разному реагируют на хронические инфекционные заболевания. Изможденный борьбой с инфекцией организм может снизить выработку антител к возбудителям, и анализ методом ИФА покажет отсутствие заражения. Но метод ПЦР при этом обязательно выявит внутриклеточных паразитов. Кроме того, информативность метода ИФА может снижаться в инкубационный период, когда организм не успевает дать свой отклик.
Таким образом, не стоит переоценивать значение анализов крови на хламидии и других внутриклеточных паразитов и считать их диагностической панацеей. Они не заменяют другие методы исследований, но в совокупности с ними позволяют найти правильное решение.
Источник
Mycoplasma pneumoniae (микоплазма пневмония) относится к классу Mollicutes, порядку Mycoplasmatales, семейству Mycoplasmataceae и роду Mycoplasma, является мембрано-ассоциированным микроорганизмом, способным к саморепликации и длительной персистенции в восприимчивом организме. Chlamydophila pneumoniae, согласно последней классификации, относится к семейству Chlamydiaceae, роду Chlamydophila, является облигатным внутриклеточным паразитом слизистой оболочки человека и животных. Цикл развития Chlamydophila pneumoniae состоит из чередования функционально и морфологически различных форм – элементарных и ретикулярных телец. Элементарные тельца метаболически малоактивны, но обладают инфекционными свойствами и способны проникать в чувствительную клетку. Ретикулярные тельца метаболически активны, обеспечивают репродукцию микроорганизма и не обладают инфекционными свойствами. M.pneumoniae и C.pneumoniae, по мнению ряда исследователей, могут длительно персистировать в клетках эпителия и лимфоглоточном кольце. Источником респираторных инфекций, вызванных M.pneumoniae и C.pneumoniae, могут быть больные и носители данных микроорганизмов в респираторном тракте. Периодически каждые 3–5 лет наблюдаются эпидемические подъемы заболеваемости, которые длятся несколько месяцев. ОРЗ, вызванные M.pneumoniae и C. pneumoniae, встречаются чаще у школьников, студентов и военнослужащих, а также у лиц с иммунодефицитом. Часто описываются семейные вспышки. Инкубационный период длится 1–4 недели. Микоплазменные пневмонии по данным ВОЗ составляют 10–20% от общего числа пневмоний. Заболевания, вызванные данными возбудителями, не поддаются лечению антибактериальными препаратами широкого спектра действия. Летальность при микоплазменной пневмонии составляет 1,4%. Данные культуральных исследований свидетельствуют о случаях носительства C.pneumoniae в лейкоцитах периферической крови (до 25% у взрослых), повышенный уровень АТ к C.pneumonia обнаруживается у 47,7% доноров крови. Носительство C.pneumoniae в эпителии верхних дыхательных путей составляет 1–2% у взрослых и 4–6% у детей без симптомов ОРЗ.
Показания к обследованию. Остро возникшее заболевание с локальными симптомами поражения верхних или нижних дыхательных путей: фарингит, гриппоподобные заболевания, синусит, бронхит, пневмония.
Дифференциальная диагностика. ОРЗ вирусной природы, коклюшная инфекция.
Материал для исследований
- Мазки из носоглотки – обнаружение АГ;
- мазки из носоглотки и ротоглотки – выявление ДНК микроорганизмов (поражение верхних дыхательных путей);
- мокрота, плевральная жидкость, аспираты из зева и трахеи, БАЛ – выявление ДНК микроорганизмов (поражение нижних дыхательных путей);
- сыворотка крови – обнаружение АТ.
Этиологическая лабораторная диагностика заболеваний включает культуральное исследование, обнаружение ДНК M.pneumoniae и C.pneumoniae, обнаружение АГ C.pneumoniae, обнаружение специфических АТ к M.pneumoniae и C.pneumoniae.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Культуральное исследование обладает низкой чувствительностью (40–60%) и длительностью (10–28 дней), в связи с чем для рутинной диагностики практически не используется.
Наиболее специфичным методом прямой диагностики названных патогенов является выявление их ДНК методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации который позволяет избежать перекрестных реакций с непатогенными для человека микоплазмами (M.salivarium, M.orale, M.buccae), в норме колонизирующими ротовую полость человека.
Для обнаружения АГ C.pneumoniae применяют методы МФА (РИФ), ИФА. Диагностическая ценность этих исследований невелика.
Для обнаружение специфических АТ к M.pneumoniae и C.pneumoniae применяют ИФА (качественные, полуколичественные и количественные тесты), РСК, МИФ. Наиболее чувствительным является выявление АТ при применении МИФ, позволяющее идентифицировать специфические иммуноглобулины G, А и М. С целью исключения ложноположительных результатов обнаружения IgM, этот показатель определяют после обнаружения повышенного уровня IgG. При таких исследованиях наибольшую специфичность имеют количественные тесты с одновременным исследованием двух образцов крови, взятых в динамике с интервалом 3–4 недели (парные сыворотки). Метод РСК, использовавшийся ранее для диагностики инфекций, вызванных C.pneumoniae, выявлял АТ к роду Chlamydophila с чувствительностью не более 30% и не позволял дифференцировать C.trachomatis, C.psittaci и C.рneumoniae.
Показания к применению различных лабораторных исследований. С целью быстрой этиологической диагностики используется выявление ДНК микроорганизмов методом ПЦР. Выявление АТ применяют для ретроспективной диагностики и ретроспективного анализа природы эпидемических вспышек.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Для диагностики заболеваний нижних дыхательных путей (бронхиты, пневмонии) мазки из носоглотки и ротоглотки использовать не рекомендуется в связи с низкой информативностью исследования данного материала. При определении титра АТ в образцах крови, взятых в динамике с интервалом 3–4 недели (парные сыворотки), диагностически значимым считается его нарастание не менее чем в 4 раза во второй сыворотке. При диагностике заболеваний, вызванных M.pneumoniae, следует учитывать, что концентрация специфических АТ к патогену при ОРЗ становится максимальной через 3–4 недели от начала болезни, затем она быстро падает ниже диагностически значимого уровня; у 30% пациентов с пневмонией, вызванной названным микроорганизмом, уровень специфических АТ не поднимается выше диагностически значимого, т. е. отрицательный результат исследования не исключает наличия инфекции. Возможно ложноположительные результаты определения АТ- IgM к C.pneumoniae в случаях присутствия ревматоидного фактора, особенно у пожилых пациентов. В связи с недостаточной чувствительностью тестов для выявления АГ методом РИФ получение отрицательных результатов при их использовании не исключает возможного инфицирования.
Источник